AML12細(xì)胞是一種常用的小鼠肝細(xì)胞系,用于模擬小鼠肝細(xì)胞在體外環(huán)境中的生物學(xué)特性。
1. 細(xì)胞培養(yǎng)基
AML12細(xì)胞通常使用DMEM/F12培養(yǎng)基,配合10%胎牛血清(FBS)或其他合適的血清替代物,如胎牛血清的去蛋白血清(FBS)或小牛血清(NCS),以提供細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子。
2. 細(xì)胞培養(yǎng)條件
溫度和濕度: 將AML12細(xì)胞培養(yǎng)在37攝氏度、5%二氧化碳(CO2)的恒溫培養(yǎng)箱中。濕度應(yīng)保持在適當(dāng)?shù)乃剑员苊饧?xì)胞脫水或過(guò)度濕潤(rùn)。
培養(yǎng)皿: AML12細(xì)胞通常在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),可以使用組織培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板等。
細(xì)胞密度: 在培養(yǎng)前,需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求將AML12細(xì)胞以適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度接種到培養(yǎng)皿中,通常為每平方厘米10,000至20,000個(gè)細(xì)胞。
3. 培養(yǎng)條件調(diào)節(jié)
培養(yǎng)基更換: 每2至3天更換一次培養(yǎng)基,以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)和健康狀態(tài),同時(shí)去除細(xì)胞代謝產(chǎn)物和廢棄物。
細(xì)胞傳代: 當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)到80%至90%的密度時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞傳代。傳代操作時(shí),需將細(xì)胞用胰酶等消化酶消化,分散后以適當(dāng)?shù)谋壤匦陆臃N到新的培養(yǎng)皿中。
細(xì)胞凍存: 若需要長(zhǎng)期保存AML12細(xì)胞,可將其凍存于液氮罐中。在凍存前,需使用適當(dāng)?shù)膬龃嬉海绾?0%二甘醇的培養(yǎng)基,以保證細(xì)胞的冷凍保存質(zhì)量。
4. 實(shí)驗(yàn)技術(shù)
AML12細(xì)胞可用于多種實(shí)驗(yàn)技術(shù),如細(xì)胞增殖和增殖分析、細(xì)胞周期分析、基因表達(dá)和蛋白質(zhì)表達(dá)分析、藥物篩選和毒性評(píng)價(jià)等。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和研究目的,選用合適的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法。
5. 應(yīng)用領(lǐng)域
AML12細(xì)胞常用于研究肝細(xì)胞生物學(xué)、肝臟功能、肝臟疾病發(fā)生機(jī)制、藥物代謝和毒性等方面。其作為小鼠肝細(xì)胞的模型系統(tǒng),在肝臟生物學(xué)和藥理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
綜上所述,AML12細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化對(duì)于維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能狀態(tài)至關(guān)重要。通過(guò)合理調(diào)節(jié)培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)條件和實(shí)驗(yàn)操作,可以保證AML12細(xì)胞在體外的穩(wěn)定生長(zhǎng)和健康狀態(tài),為相關(guān)研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)?zāi)P秃蛿?shù)據(jù)支持。