結構特點
6 孔板是一種常見的細胞培養耗材,它由透明的聚苯乙烯材料制成。每個孔的直徑相對較大,一般可以提供足夠的空間用于類器官培養。孔板底部平坦,有利于類器官在底部均勻分布生長,并且便于在顯微鏡下觀察類器官的形態和生長狀態。
適用范圍
適用于多種類器官的培養。例如,腸道類器官、肝臟類器官、胰腺類器官等都可以在 6 孔板中培養。對于起始細胞數量較多或者希望類器官生長有一定空間的情況比較合適。如果是從少量組織樣本或者單細胞開始培養類器官,6 孔板的每孔空間可以滿足細胞增殖和類器官形成的初期需求。
與培養基的配合使用
在 6 孔板中培養類器官時,根據不同類器官的要求加入特定的培養基。一般每孔可以加入適量的培養基,如 2 - 3 毫升左右,以保證類器官能夠充分浸泡在營養物質中,同時又不會因為液體過多而導致類器官漂浮或者碰撞受損。培養基的成分可以根據類器官的類型進行定制,包括基礎培養基(如 DMEM/F12)、生長因子(如 EGF、FGF 等)、營養添加劑(如 N2、B27)等。
培養環境要求
6 孔板應放置在溫度穩定(通常 37℃)、濕度適宜(一般 95% 左右)、二氧化碳濃度(5%)的細胞培養箱中。這樣的環境可以保證培養基的 pH 值穩定,為類器官的生長提供良好的條件。同時,6 孔板的透明材質便于觀察類器官的生長,在不打開培養箱的情況下,可以通過培養箱的觀察窗或者使用帶有成像功能的培養箱來監測類器官的狀態。
操作便利性
6 孔板的孔數相對較少,在進行實驗操作時比較方便。例如,在更換培養基、添加藥物或者進行其他處理時,可以比較容易地對每個孔進行操作,減少了實驗操作過程中的失誤概率。而且,在需要進行分組實驗時,6 孔板可以方便地設置不同的實驗組和對照組,每孔可以作為一個獨立的實驗單元,有利于實驗數據的對比和分析。
培養過程中的注意事項
在接種細胞或者類器官起始材料時,要注意均勻分布。可以通過輕柔搖晃或者用移液器緩慢滴加的方式,使細胞或起始材料均勻地分布在 6 孔板的底部。另外,由于 6 孔板的每孔面積相對較大,在培養過程中要注意防止污染,在打開培養箱和操作 6 孔板時,要嚴格遵循無菌操作原則,如使用無菌鑷子、移液器和在無菌超凈臺內操作等。